论文：金钗石斛种苗繁育技术
论文：金钗石斛种苗繁育技术
作者：唐德英，王云强，段立胜
【关键词】 金钗石斛； 种苗； 繁育技术
金钗石斛Dendrobium nobile LindI，为兰科石斛属多年生附生草本植物，具有滋养肺胃，清热生津之功效，是我国传统名贵中药材和新药原料［1～3］，主要来源于野生资源。由于金钗石斛在自然条件下繁殖力低，生长缓慢以及长期已往的掠夺性采挖，野生生长量远远满足不了需求量，致使金钗石斛野生资源日益枯竭［4，5］。进行人工种苗繁育、扩大种源及栽培对保护该濒危种质资源有着重要的意义。
1 无性繁殖
1.1 分株繁殖金钗石斛在每年的2～4月份都会从1～2年生的假鳞茎基部抽发笋芽，利用这一特性，可进行分株繁殖。分株繁殖宜在秋末金钗石斛已停止生长，枝茎坚实饱满，春初笋芽还未萌发前进行。 分株时，选择长势良好，无病虫害，根系发达，具有1～2年生假鳞茎较多的株丛，将其连根拔起，除去枯枝和断枝，剪掉过长的须根，老根保留3 cm左右，按3～5枝为一丛进行分割，伤口处用代森锰锌粉剂进行涂抹消毒处理，以防伤口感染腐烂，并置放阴凉通风处1 d左右即可进行种植。
用分株苗栽培，成活率高，但比较浪费材料。尤其是在野生资源极缺的今天，分株材料更是难寻，分株繁殖难以进行扩繁。
1.2 高芽繁殖每年4～7月份，株丛中有些假鳞茎的中上部的节上会有1～2个高位芽萌发（也叫高芽），当高芽苗长至2～5 cm时，圆球状基部会有旺盛的新根萌发生长，当新根长约2～3 cm时，可将高芽苗连同茎节一起剪下或整根假鳞茎一同移栽。虽然用高芽苗栽培，成活率较高，但由于高芽苗的萌发率较低，因此也不能作为主要的繁殖方法。
1.3 扦插繁殖利用金钗石斛具有萌发高芽苗的特性，分株繁殖时被剪去的断枝、老枝，将其平卧在树皮块上，使之一定程度上干缩，待到4～7月份，节上会萌发1～2个小芽，并在芽的基部生长出气生根即可移栽。
2 有性繁殖 金钗石斛在自然条件下主要靠假鳞茎的基部抽笋繁殖；部分老株，特别是受损老株在其中上部萌发高位芽进行繁殖；粉末状种子由于没有胚乳提供养分，自然条件下极难萌发［2］，但在人工条件下，给予丰富的养分及适宜的光、温条件，种子均能萌发。
2.1 选料及灭菌选用挂果8～12个月，成熟、无病虫害、无机械损伤、无自然开裂的蒴果，用自来水进行表面清洗，于超净工作台上用75％酒精表面消毒10 s后，再用0.1%升汞溶液处理8 min，用无菌水冲洗4～5次，置于无菌滤纸上备用。
2.2 培养条件
2.2.1 萌芽培养基改良培养基+NAA 0.5 mg·L－1（单位下同）+土豆200 g·L－1（单位下同）；
2.2.2 增殖培养基改良培养基+NAA 2 +土豆200；
2.2.3 成苗培养基改良培养基+NAA 0.5 +土豆200；
2.2.4 壮苗培养基改良培养基+香蕉150 g·L－1。以上培养基均附加30 g·L－1蔗糖，5 g·L－1琼脂粉，pH 5.8。温度18～28℃，光照10h/d，光照强度1 500～2 000 Lx。每2个月转接1次。
2.3 无菌播种及培养在无菌条件下，将蒴果从中间切成两段，然后用镊子夹住蒴果果皮将种子均匀撒播于萌芽培养基中进行培养。待长出具有2～3片真叶的无菌种子苗时，转接增殖培养基上进行培养，60 d后，每株小苗可形成3～7个侧芽。将增殖苗培养基中高约2 cm左右的正常小苗接种于成苗培养基上进行培养。60 d后小苗高约4 cm左右，叶展，浅绿色，茎增粗，根系发达。
把健壮成苗转接于壮苗培养基中进行培养至苗高3～8 cm，3～6片叶，叶的大小为(1～3)cm×(0.3～1) cm，苗色为浅黄绿色，茎韧性增加，根系发达，长1～3 cm，为白色或浅绿色，并附有大量的白色根毛时可出瓶炼苗。
2.4 炼苗
2.4.1 选地选择四周开阔，通风透气性好，水源充裕，交通、电力设施方便的地方建立遮阴大棚。
2.4.2 炼苗大棚荫蔽度试管苗对荫蔽度要求较高，过强的光照会灼伤试管苗娇嫩的叶片，从而使小苗叶片枯萎，脱落，影响成活及生长。适宜荫蔽度为70%～80％。
2.4.3 苗床及炼苗基质①苗床制作：苗床以离地面高80cm为宜。苗床宽120cm左右，长可根据苗圃地情况确定。苗床用筛网作基质的衬底。②炼苗基质：基质应选透气、保湿性较好的材料，树皮＋树皮屑或甘蔗渣＋陶粒混合或刨花等。基质在使用前进行高温或药物消毒处理。基质pH值以呈微酸至中性为宜。
2.4.4 清洗先将培养容器置于自然条件下培养7 d左右，然后开盖，再放3 d左右，用镊子或筷子轻轻取出幼苗，用自来水将根系上的琼脂冲冼干净，用0.01%高锰酸钾或0.1%多菌灵等杀菌剂浸泡3～5 min，稍微晾干后栽入已准备好的基质中。
2.4.5 温湿度温度对金钗石斛试管苗移栽成活率有一定影响，金钗石斛炼苗适宜温度为14～30℃，当最低平均温度低于14℃时，试管苗的根恢复慢或不生长，当最高平均温度高于30℃时，组培苗生长受抑制。
金钗石斛对水湿条件要求甚严。当空气湿度在65％～70％时，要加强基质水分管理，浇水2次/d，保持基质含水量在40％～60％为宜。当空气湿度在75％～85％时，要严格控制基质水分，注意防雨，当空气湿度大于85％时，尽量减少炼苗或不炼苗。
2.4.6 管理试管苗移栽10 d左右就会有新根长出，这时，移栽成活的试管苗可薄施复合肥，或施用1/2MS营养液进行根外追肥，促进小苗生长。待移栽4～6周后，可用0.1%的磷酸二氢钾和尿素混合溶液作根外追肥，一般每隔7～10 d喷施1次。病虫害以预防为主，每7 d进行1次苗外即苗床底部喷施杀虫剂，每15 d进行1次苗上喷施杀虫剂和杀菌剂混合液。3个月后，苗高约10 cm，茎的中上部开始变粗，出现小鼓状，新根已达到2～8 cm，此时则可出圃种植。炼苗6个月以上的试管苗，仿野生栽培成活率可达90％以上。利用生物技术进行金钗石斛的有性繁殖，虽然成本较高，但能在短时间内获得大量的种苗，是目前应用于集约化种苗生产的主要手段之一。
【参考文献】 ［1］王康正，高文远.石斛属药用植物研究进展［J］.中草药，1997,28(10):633. ［2］徐 红，王峥涛，丁家宜，等.药用石斛生物技术的研究概况［J］.中国野生植物资源，2001,20（1）:1. ［3］国家药典委员会.中国药典［S］.北京：化学工业出版社，2000：62. ［4］陈心启，合占和，罗毅波，等.中国野生兰科植物彩色图鉴［M］.北京：科学出版社，1999：183. ［5］包雪生，顺庆生，陈立钻，等.中国药用石斛彩色图谱［M］.上海：上海医科大学出版社，2001：43.
