论文：铁皮石斛人工栽培变异体1到5号的生药学研究

摘 要: 铁皮石斛系兰科石斛属植物，为我国传统名贵药材, 而人工栽培条件下的铁皮石斛产生了6种以上的自然变异体。本实验以2010版药典为依据,通过形态、组织、显微、理化等鉴定手段，对铁皮石斛的自然变异体进行生药学鉴定、分析，从而为从不同变异体中找出高产、优质的品种奠定基础，为药用濒危植物资源的保护、开发、利用提供理论依据。

关键词：铁皮石斛； 人工栽培种； 变异体； 生药学研究

 

1. 引言

铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo系兰科石斛属植物[1]，为我国传统名贵药材，以新鲜或干燥的茎入药。在《神农本草经》和《本草纲目》中均被列为上品，被誉为“中华九大仙草”之首。具有“养阴生津，润喉护嗓，温胃明目，补肾益力，延年益寿”的功效[2]。

作为疗效显著的濒危药用植物铁皮石斛资源，近年来市场需求量不断扩大。目前，铁皮石斛的人工栽培技术趋于成熟,浙江、云南等省区均有大面积栽培[3]。但人工栽培条件下的铁皮石斛产生了6种以上的不同形态，这就带来了产品良莠不齐，伪品较多，优良品种选择困难,成分含量存在差异等诸多问题。因此，以2010版药典为依据，通过形态、组织、显微、理化等鉴定手段，对铁皮石斛的自然变异体进行生药学初步研究，为从不同变异体中找出高产、优质的品种提供依据。

图1—图5分别为5种铁皮石斛人工栽培变异体植株形态,实验将对铁皮石斛Ⅰ—Ⅴ号变异体进行生药学鉴定、分析，以初步探究其与药典所载正品铁皮石斛之间的差异。

图1 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅰ号植株形态

 

图2 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅱ号植株形态

 

图3 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅲ号植株形态

 

图4 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅳ号植株形态

 

图5 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅴ号植株形态

2. 实验仪器

UV-4802H型紫外可见分光光度计、HS10260D型超声提取器、TG16-WS台式高速离心机、HH-6型数显恒温水浴锅、CS101型电热鼓风干燥箱、NiKon-YS100型生物显微镜、QP-Ⅲ生物组织切片机、CS-Ⅳ型摊片烤片机、BM-Ⅵ型生物组织冷冻包埋机、TS-12A生物组织自动脱水机、DSC-W130数码照相机、ZF8-三用紫外分析仪 

3. 形态 鉴别

3.1 植物材料来源

实验材料采自三个公司（免）铁皮石斛种植基地。经相关专家鉴定，暂定为铁皮石斛自然变异体。

3.2 植物形态

3.2.1 Ⅰ号变异体植物形态

植株倒伏，茎呈圆柱形或扁圆柱形,长35—120厘米,粗2.75—5.50毫米,不分枝,节间长2—3.5厘米；叶数列，长4—7厘米，宽14—21毫米；叶鞘略带紫斑；总状花序生于茎上端，具2—4朵花；花序柄长6—8毫米,基部具有2—3枚短鞘；花被片黄绿色，唇瓣宽卵形，唇盘在中部以上具1个大的紫红色斑块并且密布绒毛,其后方具1个黄色马鞍形腁胝体；花蕊柱绿白色，上半部生有许多先端紫色的毛,中部具有茄紫色斑块；药帽粉红色,顶端2裂,裂片尖齿状。花期4—6月。

 

图6 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅰ号

1、全株 2、茎倒伏 3、叶 4、茎 5、花序 6、7 花 8、萼瓣 9、蕊柱 10、药帽(放大)

3.2.2 Ⅱ号变异体植物形态

多年生附生草本，茎直立，圆柱形，长8.7—45厘米，粗1.39—3.33毫米，不分支，具多节，节间长1—3厘米，常在中部以上互生3—5枚叶；叶二列，纸质，长圆状披针形，长3—7厘米，宽0.7—1.5厘米，叶厚0.33—0.72毫米，先端钝钩转不明显，两面光滑无毛，基部下延为抱茎的鞘。整株植物比较矮小，植株显得比较瘦弱，茎上的膜质鞘呈灰白色。总状花序常从落了叶的老茎上部发出，具2—3朵花；花序柄长10.3毫米，基部具1枚短鞘；花序轴回折状弯曲，长10.9毫米；花苞片干膜质，浅白色卵形长约3毫米，先端钝；花梗和子房黄绿色；花开展，萼片淡黄白色，茎基部稍带黄绿色，花瓣黄绿色，长圆状，长约1.4厘米，宽4—6厘米，先端尖锐，具5条脉；侧萼片基部宽4.3毫米，萼囊圆锥形，长约6.54毫米，末端圆形；唇瓣黄绿色，宽卵形，长10—12毫米，宽8—10毫米，不明显2裂中部反折，先端钝，基部稍楔形，唇盘在中部前方具1个大的紫红色斑块并且密布绒毛，其后方具1个黄色马鞍形的胼胝体；蕊柱绿白色，长约3毫米，先端2侧各具1个紫点；蕊柱足黄绿色，中部具有1个紫色的斑块，末端紫红色﹑与唇瓣连接的关节强烈增厚；药帽粉红色，近椭圆形，顶端近锐尖并且2裂。

图7 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅱ号

1、整体植株 2、花 3、植物叶 4、植株茎（放大）

 

图8 铁皮石斛变异体Ⅱ号花解剖图

1、萼片 2、萼瓣 3、叶片 4、药帽 5、花蕊柱 6、胼胝体

 

3.2.3 Ⅲ号变异体植物形态

茎丛生，圆柱形，鲜品高5.2～31.2cm，直径2.81～6.52 mm，节间距0.78～4.8 cm，叶长2.9～5.8 cm，叶宽0.82～1.86 cm，叶厚0.48～0.75 mm；干品的高度和节间距跟鲜品差不多，直径为1.73～3.21 mm。上部茎上有时生根，长出新植株，干后呈青灰色。叶纸质，长圆状披针形，叶鞘具紫斑，鞘口张开，常与叶留下一个环状间隙[7]。人工栽培种变异体Ⅲ号，根部细小，硬度大，是外部形态鉴别于其他品种的主要依据。

总状花序常生于无叶的茎上端，长1.8～4.2cm，会这桩弯曲，常具2～4花；总花梗长约1cm；苞片干膜质，淡黄色，长4～6cm；花被片黄绿色，长约1.9cm中萼片盒花瓣相似，长圆状披针形，宽约3.5～4.2mm，顶端尖锐，侧萼片镰状三角形，基部宽约1cm，顶端急尖；萼囊明显；唇瓣卵状披针形，反折，比萼片略短，不裂开或不明显三裂，基部边缘内卷，唇盘被乳突状毛，具紫红色斑点。花期4～6月[7]。

图9 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅲ号

1、全株 2、茎 3、叶 4、花序 5、花 6、萼瓣(放大)

3.2.4 Ⅳ号变异体植物形态

茎丛生，圆柱形，鲜品高2.8～30.5 cm，直径2.9～6.64 mm，节间距0.85～3.1 cm，叶长2.2～6.7 cm，叶宽1.95～0.335 cm，叶厚0.34～0.78 mm；干品的高度和节间距跟鲜品差不多，直径为1.84～3.36 mm。上部茎上有时生根，长出新植株，干后呈青灰色。叶纸质，长圆状披针形，叶鞘具紫斑，鞘口张开，常与叶留下一个环状间隙。总状花序常生于无叶的茎上端，长1.8～4.2cm，会这桩弯曲，常具2～4花；总花梗长约1cm；苞片干膜质，淡白色，长4～6cm；花被片黄绿色，长约1.9cm中萼片盒花瓣相似，长圆状披针形，宽约3.5～4.2mm，顶端尖锐，侧萼片镰状三角形，基部宽约1cm，顶端急尖；萼囊明显；唇瓣卵状披针形，反折，比萼片略短，不裂开或不明显三裂，基部边缘内卷，唇盘被乳突状毛，具紫红色斑点。花期4～6月。

图10 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅳ号

1、全株 2、花（放大）

 

3.2.5 Ⅴ号变异体植物形态

茎直立，圆柱形，长20.2—48.2厘米，粗3.29—7.40毫米，不分枝，具多节，节间长15.60—25.32毫米,常在中部以上互生20—25枚叶；叶二列，纸质，长圆状披针形，长29.12—66.03毫米，宽13.77—17.94毫米，先端渐尖且常钩转，叶表面常扭曲，基部下延为包茎的叶鞘，叶鞘具多数紫色斑点，老时其上缘与茎松离而张开。总状花序从落了叶的老茎中上部发出，具3—5朵花；花序柄长5—10毫米，基部具2—3枚短鞘；花序轴回折状弯曲 长2—4厘米；花苞片干膜质，浅白色，卵形。长5—7毫米，先端稍钝；萼片和花瓣黄绿色，近相似，长圆状披针形，长约1.8厘米，宽4—5毫米，先端锐尖具5条脉；侧萼片基部较宽约1厘米；萼囊圆锥形，长约5毫米，末端圆形；唇瓣白色，基部具1个绿色或黄色的胼胝体，卵状披针形，比萼片稍短，中部反折，先端急尖，不裂或不明显3裂，中部以下两侧具紫红色条纹，边缘多少波状；唇盘密布细乳突状的毛，并且在中部以上具1个紫红色斑块；蕊柱黄绿色，长约3毫米，先端两侧各具1个紫点；蕊柱足黄绿色带紫红色条纹，疏生毛；药帽白色，长卵状三角形，长约2.3毫米，顶端近锐尖并且2裂。花期4－7月。

图11 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅴ号

1、植株 2、茎 3、花 4、叶

4. 性状鉴别

4.1 Ⅰ号变异体性状鉴别

鲜品,茎呈圆柱形或扁圆柱形, 长约35—120厘米,直径2.75—5.50毫米。表面灰绿色、黄绿色带光泽，具纵纹，节明显，节上有膜质叶鞘。质地柔韧,易折断,断面平坦,绿色至灰绿色。气微，嚼之味淡,久后稍有黏滞感,且多纤维。

干品，呈细长圆柱形，长约25—60厘米。表面金黄色至淡黄褐色，常见残留的叶鞘纤维。质坚实，略韧，但易折断，断面不平坦。无味，嚼之味淡。

 

图12 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅰ号药材图

1、鲜品 2、干品

 

4.2 Ⅱ号变异体性状鉴别

铁皮石斛茎经干燥后入药或经物理加工后制成名贵中药材——枫斗。干燥后的药材茎干扁圆柱形，长12—48厘米，直径1.06—2.19毫米，节间0.7—2.8厘米，表面黄色带光泽，具纵纹，节上有花序柄痕及残存叶鞘。叶鞘短于节间，节褐色，质硬而脆，易折断，断面纤维状。气微，嚼之没有粘性，纤维很多，微甜。品质要求：鲜品以色黄绿、饱满多汁、嚼之发黏为佳；干品以色金黄、有光泽、质柔韧者为佳。

图13 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅱ号药材图

1、鲜品 2、干品

4.3 Ⅲ号变异体性状鉴别

茎干后扁圆柱形，长10～45cm，直径1.5～5.0mm，节间距0.5～2.5cm，表面黄色带光泽，具纵纹，节上有花序柄痕及残存叶鞘。叶鞘短于节间，节褐色，质硬而脆，易折断，断面纤维状，鲜品茎粗3～7mm，表面黄绿色或墨绿色，叶鞘灰白色。气微、味淡、嚼之有粘性，微甜[8]。

图14 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅲ号药材图

1、 干品 2、鲜品

4.4 Ⅴ号变异体性状鉴别

茎呈圆柱形或扁圆柱形，长约20.2—48.2厘米，直径约3.29—7.40毫米，幼茎黄绿色，老茎褐绿色，表面光滑，节明显，色深。节上有膜质叶鞘，其表面有多数紫色斑点。肉质，多汁，少纤维。断面浅黄绿色，易折断。气微，味甜，嚼之有黏性

图15 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅴ号药材图

1、鲜品 2、干品

5. 显微鉴别

5.1 茎的显微鉴别

5.1.1 Ⅰ号变异体茎的显微鉴别

茎横切面：①表皮细胞由1列细胞组成，扁平，外被黄色角质层，有的外层可见无色的薄壁细胞组成的叶鞘层，边缘呈不规则波状 ②基本薄壁组织细胞呈多角形,大小相近,占据茎横切面的绝大部分, 其间散在多数维管束 ③维管束为有限外韧型,略排成4—5圈。

图16 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅰ号茎横切面详图(10×40)

                     1、叶鞘 2、角质层 3、表皮 4、薄壁细胞 5、维管束

 

 

5.1.2 Ⅱ号变异体茎的显微鉴别

表皮细胞一列，整个表皮形状深波浪形，有的地方凹陷比较大。基本薄壁细胞大小较显著，散有多数维管束，略成6—7圈。

图18 铁皮石斛变异体Ⅱ号茎的横切面详图

1、 表皮 2、基本薄壁细胞 3、维管束

 

5.1.3 Ⅲ号变异体茎的显微鉴别

铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅲ号茎横切面：①表皮细胞1列，扁平，外壁及侧壁稍增厚、微木化，表皮细胞及角质层形成内褶皱较明显。②外被黄色角质层, 有的外层可见无色的薄壁细胞组成的叶鞘层。③基本薄壁组织细胞多角形，大小相似，其间散在多数维管束，略排成4～5圈。④维管束外韧型，外围排列有厚壁的纤维束，有的外侧小型薄壁细胞中含有硅质块。

Ⅲ号变异体维管束：①薄壁细胞类圆型，占据茎横切面的绝大部分。②韧皮部外具有众多木纤维，③木质部中的导管壁较薄。④木质部导管单个或数个聚集，径向稀疏排列成放射状，导管旁有纤维束。⑤木质部中的导管壁较薄，具木纤维，少部分维管束内外两端都具有木纤维。

图19 铁皮石斛变异体Ⅲ号茎的横切面详图

1、角质层 2、表皮细胞 3、薄壁细胞 4、双韧维管束

 

图20 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅲ号维管束详图

1、薄壁细胞 2、韧皮部 3、木纤维 4、木质部 5、导管

 

5.1.4 Ⅳ号变异体茎的显微鉴别

本品茎横切面具有限外韧型维管束；茎最外层为具保护膜(叶鞘)，可与皮层剥离，棱上是有限外韧型维管束，韧皮部外具有众多木纤维。角质层黄色与表皮紧密相连；表皮为l～2列外壁增厚的细胞组成。薄壁细胞类圆型，占据茎横切面的绝大部分；有限外韧型维管束众多，散生于整个横切面。韧皮部外侧有众多纤维，呈半环状排列，壁厚；木质部中导管壁比较薄，具木纤维，少部分维管束内外两端都具有木纤维，茎老化程度越大，这一现象就越明显。

图21 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅳ号维管束详图

1、叶鞘维管束 2、表皮细胞 3、有限外韧型维管束 4、基本薄壁组织细胞

5、纤维束 6、韧皮部 7、木质部

图22 铁皮石斛人工栽培种变异体IV号叶横切面详图

1、表皮细胞 2、基本薄壁组织细胞 3、维管束 4、木质部 5、韧皮部

本品叶横切面显示叶面不定弯曲，切面内明显看出维管束以及散在的基本薄壁细胞。

5.1.5 Ⅴ号变异体茎的显微鉴别

茎类圆形，边缘不规则波状，甚至向内凹陷较深。表皮细胞1列，扁平，外壁及侧壁增厚、木化，外被黄色角质层，其外常包被薄壁组织组成的膜质叶鞘。基本薄壁组织细胞密布，大小相差不大，围绕维管束的一圈薄壁细胞较小。散在多数外韧型维管束，略排成4～5环，外围纤维束新月形或半月形，多由2列纤维组成。

图23 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅴ号维管束详图

1﹑膜质叶鞘 2﹑表皮 3﹑叶鞘维管束 4﹑基本薄壁细胞 5﹑茎维管束 6、纤维束 7﹑韧皮部 8﹑木质部

图24 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅴ号叶横切面详图

1、表皮 2、维管束 3、基本薄壁细胞 4、纤维束 5、韧皮部 6、木质部

叶呈不规则卷曲，表皮细胞1列，上表皮细胞较大，近方形。下表皮细胞较小，类椭圆形，没有栅栏组织和海绵组织的分化，为等面叶。

 

5.2 粉末鉴别

 

5.2.1 Ⅰ号变异体粉末鉴别

粉末：气清香, 味甘、微涩，灰黄色至黄绿色。①表皮细胞纺锤形，壁连珠状增厚 ②可见草酸钙针晶，长10—30um,针晶多成束 ③淀粉粒较小,圆形、长卵形或椭圆形，直径2—6um ④小型薄壁细胞中含有硅质块 ⑤多为螺纹导管，少数为网纹及具缘纹孔导管

 

图25 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅰ号粉末图(10×40)

1、草酸钙针晶束 2、硅质块 3、纤维 4、导管 5、淀粉粒 6、表皮细胞

 

 

5.2.2 Ⅱ号变异体粉末鉴别

将茎干粉碎后取极细粉末少许，于载玻片上，加水合氯醛透化加载玻片后于显微镜下进行观察，①可见不规则的表皮细胞众多，②木纤维壁稍厚，③也可见导管和大量的草酸钙针晶束，④可见束鞘纤维及含硅质块的细胞，淀粉粒极少。针晶大小30*2.5µm，淀粉粒大小1.5*2.5µm—5*2.5µm。

图26 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅱ号粉末图(10×40)

1、纤维 2、草酸钙针晶簇 3、导管 4、淀粉粒 5、含硅质块 6、表皮细胞（放大）

 

5.2.3 Ⅲ号变异体粉末鉴别

气微，味甘、嚼之有粘性，黄褐色。①淀粉粒相对多，单粒，卵形，类球形或椭圆形，直径5～20um，有的较小3～4复粒，大粒层纹隐约可见。②集聚在一起的多个硅质块细胞，直径5～11 um 。③草酸钙针晶多见，束长28～112 um。④茎表皮细胞表面观长条形，长多角形或类多角形，直径17 ～38um，纹孔稀少或不明显。⑤束鞘纤维呈长梭形，直径17～26 um，有的边缘呈齿状突起，纹孔甚少，孔沟稀疏。⑥导管多为梯形导管，少数为螺纹及具缘纹孔导管，直径10～35um，长68～100um。

图27 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅲ号粉末图(10×40)

1、 淀粉粒 2、硅质块 3、草酸钙针晶束 4、表皮细胞 5、束鞘纤维 6、导管

 

5.2.4 Ⅳ号变异体粉末鉴别

粉末：①螺纹导管单个散在或2～3个聚集存在；②淡黄色表皮细胞碎片多见，2～4个表皮细胞聚集在一起，细胞类长方形或多角形，两层壁，无增厚现象，长150～250 um，宽100～150 um；③偶见草酸钙针晶束，单个散在，长短不一，长15～27um。④淀粉粒散在较多，直径2～6um

图28 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅳ号粉末图(10×40)

1、淀粉粒（放大） 2、草酸钙针晶束 3、表皮细胞 4、硅质块 5、纤维 6、螺纹导管

 

 

5.2.5 Ⅴ号变异体粉末鉴别

表皮细胞纺锤形，壁连珠状增厚，淀粉粒密布，较小，类圆形或椭圆形，大小1.5×2.5—5×2.5µm。草酸钙针晶常见，多成束，长可达36µm，多见于近表皮处。硅质块类圆形多见于维管束旁。导管多为网纹导管。纤维呈束排列在维管束周围，有的边缘呈齿状突起纹孔甚少，孔沟稀疏。

图29 铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅴ号粉末图(10×40)

1﹑针晶束 2﹑表皮细胞 3﹑梯纹导管 4﹑硅质块 5﹑纤维 6﹑淀粉粒

 

6. 理化鉴别

6.1 多糖含量测定—对照品标准曲线的制备

铁皮石斛多糖是铁皮石斛中的主要有效成分之一。王世林等人从铁皮石斛中分离纯化得到3种多糖，确定它们为一类O-乙酰葡萄甘露聚糖[4]。据相关研究表明，铁皮石斛多糖具有抗肿瘤、降血糖等药理作用[5]。因此，实验参考2010版《药典》中的方法，对铁皮石斛5种变异体进行多糖含量的初步测定。

对照品溶液的制备: 取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖(分析纯)对照品90mg，精密称定，加水1000ml溶解,定量制成每1ml中含90μg的溶液。

标准曲线的制备: 精密量取对照品溶液0.2ml、0.4 ml、0.6 ml、0.8 ml、1.0 ml，分别置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，加5%苯酚溶液1ml，摇匀，再精密加硫酸5ml，摇匀，置沸水浴中加热20分钟，取出，放入冰浴中冷却5分钟，以相应的试剂为空白，参照2010版药典紫外－可见分光光度法，在488nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线[6]。

表1 葡萄糖标准曲线相关测量数据

 

对照品溶液体积（ml） 吸光度（A） 浓度（μg/ml）

0 0 0 0.2 0.223 2.571 0.4 0.429 5.142 0.6 0.665 7.714 0.8 0.85 10.286 1.0 0.985 12.857

注: 表，计算回归方程为 y = 0.0785x + 0.0188 回归系数R2 = 0.9964

图12 对照品溶液葡萄糖标准曲线图

 

6.2 多糖含量测定—供试品溶液的制备

供试品溶液的制备: 取Ⅰ—Ⅴ号样品粉末各约1.5g，精密称定，加水200ml，加热回流提取2小时，提取液转移至250ml量瓶中，用适量水分次洗涤容器，洗液转移至同一量瓶中，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液1ml，置15ml离心管中，精密加入无水乙醇5ml，摇匀，冷藏1小时，取出，离心（4000转/分钟）20分钟，弃去上清液，必要时滤过，沉淀加80%乙醇洗涤2次，每次8ml，离心，弃去上清液，沉淀加热水溶解并转移至100ml量瓶中(实际转移量为62.5ml)，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法 精密量取供试品溶液1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加 5%苯酚溶液1ml”起，依法测定吸光度。重复上述步骤5次，求出供试品吸光度平均值，根据葡萄糖标准曲线，求出供试品溶液中无水葡萄糖的量。

表2 变异体Ⅰ号供试品溶液吸光度测定值 表3 变异体Ⅱ号供试品溶液吸光度测定值

 

测量次数 吸光度（A） 平均值

1 0.255 2 0.256 3 0.253 0.255 4 0.254 5 0.257

测量次数 吸光度（A） 平均值

1 0.287 2 0.279 3 0.291 0.284 4 0.282 5 0.281

表4 变异体Ⅲ号供试品溶液吸光度测定值 表5变异体Ⅳ号供试品溶液吸光度测定值

测量次数 吸光度（A） 平均值

1 0.359 2 0.342 3 0.351 0.351 4 0.340 5 0.353

测量次数 吸光度（A） 平均值

1 0.558 2 0.572 3 0.559 0.564 4 0.549 5 0.582

表6 变异体Ⅴ号供试品溶液吸光度测定值 表7 5种铁皮石斛变异体多糖含量

测量次数 吸光度（A） 平均值

1 0.578 2 0.575 3 0.573 0.576 4 0.579 5 0.575

样品号数 多糖含量(％)

Ⅰ 24.63 Ⅱ 21.68 Ⅲ 50.71 Ⅳ 30.90 Ⅴ 51.61

 

经初步计算，铁皮石斛人工栽培变体Ⅰ—Ⅴ号供试品，含铁皮石斛多糖以无水葡萄糖（C6H12O6）计，分别为24.63％、21.68％、50.71％、30.90％、51.61％。

7. 小结与讨论

2010版药典对铁皮石斛的显微鉴别描述为“表皮细胞1列，扁平，外壁及侧壁稍增厚、微木化，外被黄色角质层, 有的外层可见无色的薄壁细胞组成的叶鞘层。基本薄壁组织细胞多角形，大小相似，其间散在多数维管束，略排成4～5圈，维管束外韧型，外围排列有厚壁的纤维束，有的外侧小型薄壁细胞中含有硅质块。含草酸钙针晶束的黏液细胞多见于近表皮处[7]。”

1、通过对铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅰ号的植物形态、药材性状、显微及理化鉴别特征的研究，表明：①植株倒伏，长35—120厘米，不分枝。②黄色马鞍形腁胝体出现在唇瓣中部，与《中国植物志》所描述的黄色腁胝体位于唇瓣基部有区别。③《中国植物志》中所载铁皮石斛药帽为白色，与本品药帽粉红色有差异。④本品性状上与正品铁皮石斛无太大差异，但纤维含量较大，久嚼稍有黏滞感,口感不佳,与正品铁皮石斛相比较,品质较次。⑤初步从显微鉴别来看，此变异体与2010版药典所载铁皮石斛无较大的差异。⑥就多糖含量而言，Ⅰ号变异体质量低于药典所载之正品铁皮石斛。

2、Ⅱ号变异体植株矮小、纤维多、淀粉粒少、多糖浓度含量低，此栽培变异品种就目前实验结论而言没有研究价值。

3、通过对铁皮石斛人工栽培种变异体Ⅲ号的植物形态、药材性状、显微及理化鉴别特征的研究，表明：①植株相对矮小，长10—45厘米，不分枝。②根部细小质硬而脆。③《中国植物志》中所载铁皮石斛药帽为白色，与本品药帽紫红色有差异。④本品性状上与正品铁皮石斛无太大差异，纤维含量较小，嚼之黏滞感强,味微甜,品质相近于正品铁皮石斛。⑤从显微鉴别来看，此变异体与2010版药典所载铁皮石斛无较大的差异。⑥多糖含量经初步测定，以无水葡萄糖（C6H12O6）计，为50.71％，符合2010版药典规定的不得少于25％的标准。

4、铁皮石斛人工栽培种变异体IV号从植物形态上看，最为接近《中国植物志》中铁皮石斛的描述，多糖含量亦符合2010版药典规定的不得少于25％的标准。

5、Ⅴ号变异体，从显微鉴别来看，淀粉粒分布较其他变异体密集，多糖含量﹙以无水葡萄糖计﹚达51.61％，为实验所选用五种变异体中最高的。

6、以上均属于初步实验数据，有待进一步验证；上述变异体与标准铁皮石斛的亲缘关系，变异体化学成分、药理学、药效学等方面的详细分析有待深入进行。

 

参考文献

［1］吉占和．中国植物志［M］．北京：科学出版社，1999，(19)：117

［2］张奇 ，段承俐．铁皮石斛的鉴定研究［J］. 生物技术通报, 2008,6

［3］周秀佳，顺庆生 中药资源学［M］ 上海：科学技术文献出版社，2007:274

［4］刘春兰. 少数民族地区药用植物多糖的化学与药理［M］ 2008;266

［5］张治国，俞巧仙，叶智根 . 名贵中药-铁皮石斛［M］. 上海：科学技术文献出版

2006:48

［6］国家药典委员会.中华人民共和国药2010版(一部)［M］.北京:中国医药科技社,

2010:267

［7］国家药典委员会.中华人民共和国药2010版(一部)［M］.北京:中国医药科技社,

2010:266

 

实习学生: 何鹏飞 李进涛 杨辉 赵志刚 李强

指导老师：冯德强 (云南中医学院 教授)