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石斛知识

石斛对实验慢性萎缩性胃炎大鼠外周血T淋巴细胞亚群功能改善情况

2020-03-12 08:20:41 0
论文:石斛对实验慢性萎缩性胃炎大鼠外周血T淋巴细胞亚群功能改善情况的观察 作者:陆高翔 ,潘小炎,李天资,韦华,周喜汉,尹毅霞 【摘要

论文:石斛对实验慢性萎缩性胃炎大鼠外周血T淋巴细胞亚群功能改善情况的观察

作者:陆高翔 ,潘小炎,李天资,韦华,周喜汉,尹毅霞

【摘要】    目的探讨石斛对慢性萎缩性胃炎(CAG)的防治机理,为临床提供理论依据。方法用氨水、乙醇和去氧胆酸钠灌胃法,制成大鼠CAG模型。造模后治疗组以石斛煎剂治疗5周,观察CD3+、CD4+和CD8+阳性细胞数的变化情况,计算CD4+/CD8+比例,并与模型组和对照组比较。结果治疗组和模型组建模后(治疗前)其CD3+、CD4+阳性率和CD4+/CD8+比例较对照组低(P<0.01)、CD8+阳性率较对照组高(P<0.01),治疗组经石斛治疗5周后,其CD3+、CD4+、CD8+阳性率和CD4+/CD8+比例与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05) 。结论石斛可以改善实验CAG大鼠的T淋巴细胞亚群功能,提示其对CAG大鼠的免疫功能有提高作用,从而对CAG有防治作用。

【关键词】  慢性萎缩性胃炎 实验大鼠 石斛 T淋巴细胞亚群功能    研究发现,慢性萎缩性胃炎(CAG)癌变率较高,现代医学除密切随访和手术治疗外,尚无其他较好的治疗方法。临床实践表明,中医中药治疗本病取得了较为满意的效果,显示了其广阔的发展前景[1]。本文在建立萎缩性胃炎大鼠病理模型成功的基础上,观察中药石斛对萎缩性胃炎大鼠外周血T淋巴细胞亚群功能的改善情况,探讨石斛治疗本病的作用机理。  

1  方法  

1.1  动物及分组采用(60±2)d龄,体重(200±10)g,一级质量标准的雌性远交系Wistar大鼠,由广西医科大学实验动物研究所提供。购回后采用架式笼养,室温为(20±2)℃,湿度50%~60%,光照明暗各12 h交替,单独空调。先在动物室饲养4 d后随机分为对照组、模型组和石斛治疗组组,分笼喂养,每笼25只。  

1.2  药物及试制[2] 氨水,中国瓶窑医药化工试制厂产品,批号20060431,现用现配成浓度0.1%氨水;乙醇,纯度>99.5%,宜兴市钮家化工助剂厂产品,批号20060113,现用现配成60%乙醇溶液;去氧胆酸钠,Serva公司生产产品,上海化学试制采购供应站进口分装经销,批号2005618,现用现配成20 mmol/L溶液;石斛煎剂,石斛300 g加水2 000 ml于陶瓷皿慢火煎60 min,过滤备用。  

2  方法   

2.1  造模及处理①对照组:不造模,灌服生理盐水;②模型组和石斛治疗组:用0.1%氨水作为饮用水自由饮用;20mmol的去氧胆酸钠溶液灌胃1次/d,2 ml/次;60%的乙醇空腹灌胃2次/周,2 ml/次。上述3因素共处理16周建立鼠CAG模型;对照组用生理盐水灌胃, 每只5 ml, 1次/d, 连续5周。实验进行至16周(治疗前)每组取11只大鼠处死;取标本备检,对照组鼠胃病检无明确病态表现,模型组和石斛治疗组鼠胃病检均符合慢性萎缩性胃炎表现,表示造模成功。模型组停止造模,灌服生理盐水,石斛治疗组也停止造模,每只大鼠灌服石斛水煎剂5 ml/d,连续5周。  

2.2  T淋巴细胞亚群的测定至21周(治疗结束后),大鼠禁食不禁水12 h,按45 mg/kg体重腹腔注射戊巴比妥钠将动物麻醉,摘眼球取血1~2 ml,置于肝素抗凝的试管中,应用美国Beckman-Coulter公司EPICS-XL型流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群,试剂盒由浙江杭州联科生物技术工程公司提供,全部操作按照说明书进行[3]。  

2.3  数据处理计量资料用±s表示,运用SPSS12.0统计软件包进行检验。3组资料比较用F检验,两两比较用LSD检验。P<0.05为差异有显著性意义。  

3  结果     各组实验大鼠治疗前后T淋巴细胞亚群检测结果。检测结果见表1。表1   各组T淋巴细胞亚群检测结果比较(略)   

4  讨论    研究表明,CAG患者存在免疫功能低下,并与胃病的严重程度有关,T细胞分化抗原相应单抗的临床意义主要在于评估机体免疫状态。T淋巴细胞亚群相对平衡维持着机体的正常免疫功能,在保护机体免受各种疾病侵袭的过程中起着重要的作用[4]。CD3+是与T细胞抗原受体相关联的一种表面抗原,常用于检测成熟T细胞数;CD4+代表辅助性T细胞,其功能为协助B细胞、单核及巨噬细胞与杀伤性T细胞发挥免疫功能;CD8+代表抑制和细胞毒性T细胞。在T细胞亚群中,CD4+/CD8+的数量和适当的比例是免疫调节的关键。CD4+、CD8+ 彼此相互调节,能表现辅助和抑制的作用,是免疫系统的核心[5,6]。 石斛有健脾益气之功能。动物实验证实,石斛可使气虚证大鼠体液免疫反应明显增强,血清抗体效价提高,也可使血清IgG含量增多,诱导B细胞分化,促进B细胞合成、分泌IgM、IgG,同时能使大鼠抗体分泌细胞数增多[1]。临床资料表明,石斛能使脾虚证患者减退的免疫功能得以在体液和细胞免疫功能方面全面明显提高,尤其是细胞免疫功能,其原因在于石斛直接促进表现为特异性免疫淋巴细胞的分化、增殖,提高非特异免疫的NK细胞活性、嗜中性细胞吞噬指数,同时还能改善消化功能,增加免疫球蛋白的产生。石斛可以增强机体的免疫功能[7]。

本研究结果表明,实验CAG大鼠外周血CD3+,CD4+阳性细胞数目显著降低(P<0.01),CD8升高(P<0.01),CD4+/CD8+比值下降(P<0.01),表明CAG大鼠机体免疫力下降,经石斛治疗后,CD3+、CD4+ 阳性细胞数目显著升高(P<0.01),CD8+阳性细胞数目降低(P<0.01),CD4+/CD8+比值上升(P<0.01),表明石斛可以调节实验CAG大鼠免疫功能,促进胃粘膜的修复,从而对CAG有防治作用。

 

 

【参考文献】    [1]王 茜,龚其海,吴 芹,等.石斛生物总碱对原代皮层神经元氧糖剥夺的保护作用[J]. 中国药理通讯,2006,23(4):44.  [2]Machida-Montani A, Sasazuki S, et al. Atrophic Gastritis, Helicobacter pylori and Colorectal Cancer Risk: A Case-Control Study[J]. Helicobacter. 2007,12(4):328.  [3]Liu WL, Chen SJ, Chen Y, et al. Protective effects of heat shock protein70 induced by geranylgeranylacetone in atrophic gastritis in rats[J]. Acta Pharmacol Sin. 2007,28(7):1001.  [4]黄妙珍,陈芝芸,严茂祥,等.补气养阴解毒方对慢性萎缩性胃炎大鼠表皮生长因子和生长抑素的影响[J]. 浙江中医杂志,2003,38(7):314.  [5]Kodama M, Murakami K, Sato R, et al. Helicobacter pylori-infected animal models are extremely suitable for the investigation of gastric carcinogenesis[J]. World J Gastroenterol,2005,11(45):7063.  [6]Campana D, Nori F, Pagotto U, et al. Plasma acylated ghrelin levels are higher in patients with chronic atrophic gastritis[J]. Clin Endocrinol (Oxf),2007,8(5):213.  [7]Cindoruk M, Yetkin I, Deger SM,et al. Influence of H pylori on plasma ghrelin in patients without atrophic gastritis.World[J]. Gastroenterol,2007,13(10):1595.