论文：气相色谱-质谱联用测定黔产金钗石斛精油成分研究
论文：气相色谱-质谱联用测定黔产金钗石斛精油成分研究
作者：黄小燕 乙引 张习敏 杨立昌 徐小蓉
【摘要】 目的探索黔产金钗石斛精油成分。方法采用水蒸气蒸馏方法提取金钗石斛精油，以气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术结合计算机检索对其化学成分进行分离鉴定，按面积归一法计算各化学成分的相对含量。结果4个产地金钗石斛均含有甲安菲他明、β-蒎稀、莰烯、桉叶油素、芳樟醇、雪松醇、环己醇、安息香酸等成分，此外，赤水产金钗石斛精油中萜类和倍半萜类较多，而其它三地出产的金钗石斛醇类、烯类、烷烃类化合物居多。结论各产地金钗石斛精油成分含量不同。
【关键词】 金钗石斛; 精油; 气相色谱-质谱联用法精油(essential oils)是一类在常温下能挥发的、可随水蒸气蒸馏的、与水不相混溶的油状液体的总称。大多数精油具有芳香气味，是一类重要的活性成分，具有发散解热、芳香开窍、理气止痛、祛风除湿、活血化瘀、祛寒温里、清热解毒、解暑祛秽、杀虫抗菌等作用，被广泛应用于临床、食品和化妆品工业。
作为名贵中药，金钗石斛Dendrobium nobile在《神农本草经》和《本草纲目》中被列为上品，具有益味生津、滋阴清热、明目利嗓等功效，用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病症。目前，金钗石斛有效成分研究主要集中在生物碱和多糖。此外，研究还发现金钗石斛具有某些抗癌活性成分，如Stilbenoids类、菲类和联苄类物质[1]以及抗血小板凝集作用的化合物，如石斛酚二醋酸盐[2]。贵州是金钗石斛药材的传统产地，赤水金钗石斛于200512通过国家地理标志产品保护的专家审查，成为贵州省第一个获得原产地产品保护的中药材产品。目前，赤水金钗石斛与贵州其他产地金钗石斛精油成分之间的比较还未见报道。本文拟通过对贵州不同产地金钗石斛精油成分的GC-MS研究，比较不同产地金钗石斛精油成分的异同，为金钗石斛鉴别和开发提供理论和实验依据。
1 材料 金钗石斛Dendrobium nobile分别采收于贵州省赤水、罗甸、独山和兴义4地，均为3年生鲜品。超声清洗仪(KS-1000D);气相色谱-质谱联用仪(SHIMADZU QP2010)。所用试剂均为色谱纯。
2 方法 2.1 精油提取取金钗石斛茎300 g，切成薄片，粉碎，过40目筛，常压水蒸气蒸馏提取8 h，用乙醚萃取2次，无水硫酸钠除水分，过滤，获得具有特殊气味的乳白色油状物。 2.2 GC-MS分析
2.2.1 气相色谱条件色谱柱Phenyl Methyl Siloxane(30 m×0.25 mm×0.25 μm)。采用程序升温，50℃保持1 min，以6℃/min上升至100℃，然后以3℃/min上升至180℃，再以20℃/min上升至260℃，恒温5 min。汽化室温度250℃，载气为高纯He(99.999%)，柱前压51.98 kPa，载气流量1.0 ml/min，进样量1 μl，分流比20∶1。 2.2.2 质谱条件离子源为EI源，离子源温度230℃，四极杆温度150℃，电子能量70 eV，发射电流34.6 μA，倍增器电压1 294 V，接口温度280℃，溶剂延迟5 min，质量范围10～550 mAU。
3 结果 3.1 黔产金钗石斛精油组分的GC-MS图谱用GC-MS联用仪对总离子流色谱图进行分析和处理，根据相应的MS图谱，用NIST谱库系统检索，确定化学成分，并用峰面积归一法计算各组分的相对含量。见图1，表1。 图1a中几个主要的峰所代表的化合物分别是桉叶油素、蒈烯、雪松烯、罗汉柏烯、莰烯、β-蒎稀等;图1b中几个主峰所代表的化合物分别是桉叶油素、蒈烯、雪松烯、罗汉柏烯、β-蒎稀、十六碳烯酸等，图1c中几个主峰所代表的化合物分别是咪唑、乙酰胺、芳樟醇、环己醇、茴香醚、乙酰胺等，图1d中几个主峰所代表的化合物分别是桉叶油素、咪唑、雪松烯、罗汉柏烯、芳樟醇氧化物等。
3.2 黔产金钗石斛精油组分的比较分析4个产地金钗石斛精油的化学成分及其相对含量见表1。 结果表明，不同产地金钗石斛精油的成分存在一定差异。在已鉴别出的47种化合物中，4个产地金钗石斛精油中均含有的成分有甲安菲他明(兴奋剂)(1.32%～2.10%)、β-蒎稀(1.29%～7.31%)、莰烯(0.86%～6.41%)、桉叶油素(0.38%～18.68%)、雪松醇(0.28%～1.41%)、环己醇(0.12%～12.50%)、安息香酸(0.09%～1.15%)等，但以桉叶油素在精油中含量较高，为18.68%。此外，其他成分在各产地金钗石斛中的含量和种类均不相同，其中，赤水产金钗石斛精油中萜类和倍半萜类居多，而其它3地出产的金钗石斛醇类、烯类、烷烃类化合物居多。表1 不同产地金钗石斛精油的化学成分
4 讨论 黔产金钗石斛精油中含有多种有效成分，不同产地金钗石斛精油的成分存在一定差异。在已鉴别出的29～30种化合物中，桉叶油素在精油中含量最高，其次是β-蒎稀、蒈烯、莰烯、桉叶油素、芳樟醇、龙脑、罗松烯等单萜、倍半萜化合物，分别具有镇痉、平喘、强心、镇咳、去痰、抗菌、消炎、抗病毒、抗氧化等作用[3]。其他成分在各产地金钗石斛中的含量和种类均不相同，赤水产金钗石斛精油中萜类和倍半萜类居多。萜类化合物是存在于植物界的一大类化合物，具有多种生物活性，并且是某些中药的主要有效成分[3,4]。而其它三地出产的金钗石斛醇类、烯类、烷烃类化合物居多，这与出产地的生态环境(土壤、温度、光照、水等)有关。金钗石斛精油化学成分和含量的差异与其药用价值密切相关，所以在中成药产品质量控制中，应确定药材的产地。本文仅研究了贵州赤水与兴义、独山、罗甸4个产地金钗石斛精油成分的种类和含量，至于它与其他产地金钗石斛精油成分之间是否存在差异，有待于进一步研究。
【参考文献】 [1] 夏春冬，廖学才.石斛药用概述[J].实用中医学杂志，1998，14(4)：45. [2] 国家药典委员会.中国药典[S].北京：化学工业出版社，2000：70. [3] 周 欣.迷迭香挥发性成分的质谱分析[J].贵州科学,2001,20(1):78. [4] 彭 锐,范俊安.石斛属药用植物种质资源研究进展[J].时珍国医国药,2001,12(3):273.
